1. রক্তে এন্ডোটক্সিন নির্ধারণ করার সময়, পদ্ধতি এবং বিকারক নির্বাচনের দিকে মনোযোগ দিন।
2. প্লাজমা বা সিরাম প্রস্তুতি
একটি সাধারণ ক্লিনিকাল নমুনা হিসাবে, প্লাজমা হল প্রধান নমুনা, এবং এর ব্যবহারের হার 95% এর বেশি। অতএব, শরীরের তরল প্রধান অংশ হিসাবে প্লাজমা প্রস্তুত করা খুবই গুরুত্বপূর্ণ। দাসের মতে, এন্ডোটক্সিন সাধারণত মুক্ত অবস্থার পাশাপাশি প্লেটলেটগুলির সাথে সংযুক্ত থাকে, তাই নমুনা হিসাবে প্রচুর পরিমাণে প্লেটলেট ধারণকারী প্লাজমা ব্যবহার করা আরও উপযুক্ত। মানুষের রক্তরস বা প্রাণীর প্লাজমা তৈরি করার সময়, বর্তমানে, কোষের ক্ষতি রোধ করার জন্য, বিদেশী দেশগুলি বেশিরভাগই কম-তাপমাত্রার বিচ্ছেদ ব্যবহার করে, প্রচুর পরিমাণে প্লেটলেট ধারণকারী প্লাজমা নমুনা ব্যবহার করে, অর্থাৎ, 4 ℃ 1000gx10 মিনিট বিচ্ছেদ শর্তে, বা 3000gx40 সেকেন্ড বিচ্ছেদ অবস্থা যখন কোন নিম্ন-তাপমাত্রা সেন্ট্রিফিউজ নেই। এটি স্বাভাবিক তাপমাত্রার অধীনে উচ্চ-গতি এবং দীর্ঘমেয়াদী পৃথকীকরণ পরিচালনা করার অনুমতি নেই। উপরন্তু, প্লাজমা বা সিরাম পৃথক করার সময়, ব্যাকটেরিয়া দূষণ এড়ানো উচিত।
সিরাম তৈরি: রক্ত সংগ্রহের জন্য অ্যান্টিকোয়াগুল্যান্ট ছাড়া একটি সিরিঞ্জ ব্যবহার করুন এবং এটিকে একটি সেন্ট্রিফিউজ টিউবে স্থানান্তর করুন এবং 30 মিনিটের জন্য বরফের জলের স্নানে রাখুন, 4 ℃, 1000xg, সেন্ট্রিফিউগেশনের জন্য 10 মিনিট।
প্লাজমা বা সিরাম আলাদা করার পরে, যদি সাময়িকভাবে ব্যবহার না করা হয়, তবে এটি হিমায়িত করা যেতে পারে - 80 ℃ এবং 1 মাসের মধ্যে ব্যবহার করা যেতে পারে। দ্রষ্টব্য এন্ডোটক্সিনের শোষণ এড়াতে, স্টোরেজের জন্য একটি গ্লাস টেস্ট টিউব ব্যবহার করুন।
3. অ্যান্টিকোয়াগুল্যান্টের প্রকার এবং প্রভাব
প্লাজমা তৈরির সময়, কিছু নির্দিষ্ট অ্যান্টিকোয়াগুলেন্ট যোগ করার কারণে, অ্যান্টিকোয়ুলেন্টের ধরন এবং পরিমাণ পুনরুদ্ধারের হারের উপর বড় প্রভাব ফেলে। সাধারণত, সাধারণত ব্যবহৃত অ্যান্টিকোয়াগুলেন্টগুলির মধ্যে প্রধানত হেপারিন, সোডিয়াম সাইট্রেট এবং EDTA অন্তর্ভুক্ত থাকে, যার মধ্যে হেপারিন সবচেয়ে বেশি ব্যবহৃত হয়। যাইহোক, আমরা জানি যে প্রচুর পরিমাণে হেপারিন এন্ডোটক্সিন প্রতিক্রিয়াতে হস্তক্ষেপ করবে, বিশেষত পাতলা গরম করার পদ্ধতি এবং ক্লোরোফর্ম নিষ্কাশন পদ্ধতির জন্য, যা পুনরুদ্ধারের হার কমিয়ে দেবে, কিন্তু পিসিএ পদ্ধতিতে কম প্রভাব ফেলবে, তাই হেপারিনের পরিমাণ যোগ করা হয়েছে। এবং প্লাজমা তৈরির সময় মুক্তি পাওয়া মাত্র 2~5 μL/ml যথেষ্ট।