আর ecovery

1. তরল নাইট্রোজেন থেকে হিমায়িত টিউবটি সরান এবং সঙ্গে সঙ্গে একটি 37℃ জলের স্নানে, সামান্য ঝাঁকুনি দিন। তরল গলে যাওয়ার পরে (প্রায় 1-1.5 মিনিট), কিছু অ্যালকোহল বের করুন এবং এটি অতি-পরিষ্কার কাজের টেবিলে রাখুন।

2. সেল সাসপেনশনটিকে একটি 15ml সেন্ট্রিফিউজ টিউবে 10ml মাঝারি দিয়ে নিন (মাঝারি দিয়ে হিমায়িত টিউবটি ধুয়ে ফেলুন এবং দেয়ালে আটকে থাকা সমস্ত কোষ ধুয়ে ফেলুন) এবং 5 মিনিটের জন্য 1000 এ সেন্ট্রিফিউজ করুন।

3. সুপারন্যাট্যান্টকে বিপরীত করা হয়েছিল এবং কোষগুলিকে স্থগিত করার জন্য মাধ্যমটির 1ml যোগ করা হয়েছিল। 10 মিলি মাঝারি দিয়ে একটি 10 ​​সেমি ডিশে ধূমপান করুন এবং থালাটির কোষগুলিকে সমানভাবে বিতরণ করতে আলতো করে বাম এবং ডানদিকে ঝাঁকান।

4. কোষের ধরন এবং তারিখ, মানুষের নাম, ইত্যাদি চিহ্নিত করুন, এটি CO2 ইনকিউবেটরে রাখুন, কোষগুলি আটকান এবং মাধ্যম পরিবর্তন করুন।

5. মাধ্যম প্রতি 3 দিনে একবার পরিবর্তন করা হয়েছিল।

পৃ assage

1. গাছপালা 80-90% কভারেজ পৌঁছানোর জন্য পাস করা হয়েছিল।

2. মূল মাধ্যম আউপ .

3. উপযুক্ত ট্রিপসিন যোগ করুন (শুধু কোষগুলিকে ঢেকে রাখুন) এবং 1-2 মিনিটের জন্য হজম করুন .

4. সিরাম-ধারণকারী মাধ্যমের সমান ভলিউম যোগ করে হজম বন্ধ করা হয়েছিল .

5. একটি পাইপেট বন্দুক দিয়ে কোষগুলিকে উড়িয়ে দিন এবং সেগুলিকে স্থগিত রেখে দিন।

6. কোষগুলিকে একটি 15 মিলি সেন্ট্রিফিউজ টিউবে উচ্চাকাঙ্খিত করা হয়েছিল এবং 5 মিনিটের জন্য 1000 এ সেন্ট্রিফিউজ করা হয়েছিল।

7. সুপারন্যাট্যান্ট ঢালা এবং 1-2 মিলি মিডিয়াম যোগ করুন যাতে সমস্ত কোষ উড়িয়ে দেওয়া যায়।

8. কোষগুলি কোষের প্রজাতির উপর নির্ভর করে বিভিন্ন সংস্কৃতির খাবারে প্রেরণ করা হয়েছিল। সাধারণত, ক্যান্সার কোষগুলিকে 5টি কোষে ভাগ করা হয় এবং তিনটি স্বাভাবিক কোষ প্রেরণ করা হয়। চাষ চালিয়ে যান।

কোষগুলিকে হজম করতে এবং সেন্ট্রিফিউজ করার জন্য বিনামূল্যে (ibid. উপরে)।

মিলিত হিমায়িত স্টোরেজ দ্রবণ সহ কোষগুলিকে সাসপেনশন করুন, সেগুলিকে একটি জীবাণুমুক্ত ফ্রিজার টিউবে ভাগ করুন, কয়েক মিনিটের জন্য বিশ্রাম নিন এবং সেলের ধরন এবং হিমায়িত স্টোরেজ তারিখ নির্দিষ্ট করুন। 4℃ 30min, -20℃ 30min, -80℃ রাতারাতি, এবং তারপর তরল নাইট্রোজেন পারফিউশনে সংরক্ষণ করা হয়।

ক্রায়োপ্রিজারভেশন দ্রবণ প্রস্তুত: 70% মাঝারি 20% FBS 10% DMSO। DMSO ধীরে ধীরে যোগ করা উচিত এবং স্থিরভাবে কাঁপানো উচিত।