ELISA সনাক্তকরণ পরীক্ষায় একটি সহায়ক উপাদান হিসাবে, একটি এনজাইম প্লেট একটি নিষ্পত্তিমূলক ভূমিকা পালন করে এবং সরাসরি চূড়ান্ত পরীক্ষামূলক ফলাফল প্রভাবিত করে। এর গুণমান এনজাইম প্লেট প্রধানত প্রোটিন শোষণের সংবেদনশীলতা, প্লেট এবং গর্তের মধ্যে প্রোটিন শোষণ ক্ষমতার পার্থক্য এবং ক্রয়কৃত ব্যাচগুলির মধ্যে পার্থক্যের উপর নির্ভর করে এনজাইম প্লেট . অতএব, একটি নির্বাচন এনজাইম প্লেট উচ্চ প্রোটিন শোষণ সংবেদনশীলতা সহ পণ্য, প্রোটিন শোষণ ক্ষমতার গর্তের মধ্যে ছোট পার্থক্য এবং ব্যাচগুলির মধ্যে একটি ছোট পার্থক্য হল পরীক্ষাকারীর জন্য নির্ভরযোগ্য এবং স্থিতিশীল পরীক্ষামূলক ফলাফল পাওয়ার গ্যারান্টি।

এনজাইম প্লেট শ্রেণীবিভাগ: বিভিন্ন শ্রেণীবিভাগ মান অনুযায়ী, প্লেট আছে বিভিন্ন শ্রেণীবিভাগ।

১: গর্তের সংখ্যা অনুসারে, এটিকে 96টি গর্ত, 48টি গর্ত ইত্যাদিতে ভাগ করা যায়। কারণ এনজাইম প্লেট প্রধানত মাইক্রোপ্লেট রিডারের সাথে ব্যবহৃত হয়, প্লেট বাজারে মিটার সর্বাধিক 96 ছিদ্র, তাই মাইক্রোপ্লেট 96 গর্ত।

2: বিভিন্ন বটম অনুসারে, এটি সমতল নীচে, U নীচে, ভি নীচে, ইত্যাদিতে বিভক্ত।

সমতল ভিত্তির প্রতিসরণ সূচক কম, যা মাইক্রোপ্লেটে সনাক্তকরণের জন্য উপযুক্ত;

টি he U মাইক্রোপ্লেট প্রতিসরাঙ্ক সূচক উচ্চ, নমুনা, নমুনা এবং মিশ্রণের জন্য সুবিধাজনক, এবং এটি মাইক্রোপ্লেটে না রেখে সরাসরি রঙের পরিবর্তন পর্যবেক্ষণ করতে পারে, যাতে একটি সংশ্লিষ্ট অনাক্রম্য প্রতিক্রিয়া আছে কিনা তা নির্ধারণ করা যায়।

V বেসের মাইক্রোপ্লেট সঠিকভাবে নমুনা শোষণ করতে পারে।

3: মাইক্রোপ্লেট এবং প্রোটিন এবং অন্যান্য অণুর বিভিন্ন বাঁধাই ক্ষমতা অনুসারে, এটি উচ্চ বাঁধাই বল, মাঝারি বাঁধাই বল এবং অ্যামিনেশনে বিভক্ত।

(1) উচ্চ বাঁধাই বল

এই মাইক্রোপ্লেটের পৃষ্ঠের পরে, এর প্রোটিন বাঁধাই করার ক্ষমতা ব্যাপকভাবে বৃদ্ধি পায়, 300~400ng IgG/cm2 পর্যন্ত, এবং প্রধান আবদ্ধ প্রোটিনের আণবিক ওজন হল> 10 kD। মাইক্রোপ্লেটের এই শ্রেণীর ব্যবহার সংবেদনশীলতা উন্নত করতে পারে, এবং প্রলিপ্ত প্রোটিনের ঘনত্ব এবং পরিমাণ তুলনামূলকভাবে কমাতে পারে, যা অ-নির্দিষ্ট প্রতিক্রিয়া তৈরি করা সহজ। অ্যান্টিজেন বা অ্যান্টিবডি দিয়ে প্রলেপ দেওয়ার পরে, অ-আয়নিক ডিটারজেন্ট কার্যকরভাবে আনবাউন্ড প্রোটিনের স্থানটিকে সিল করতে পারে না এবং প্রোটিনটিকে সিল্যান্ট এজেন্ট হিসাবে ব্যবহার করা উচিত।

(2) মাঝারি বাঁধাই বল

এই ধরনের মাইক্রোপ্লেট প্লেটগুলি নিষ্ক্রিয়ভাবে পৃষ্ঠের হাইড্রোফোবিক বন্ধনের মাধ্যমে প্রোটিনের সাথে আবদ্ধ হয় এবং 200 থেকে 300 ng IgG/cm2 প্রোটিন বাঁধাই ক্ষমতা সহ আণবিক ওজন> 20 kD সহ ম্যাক্রোমোলিকুলার প্রোটিনের জন্য কঠিন-ফেজ বাহক হিসাবে উপযুক্ত। শুধুমাত্র ম্যাক্রোমলিকিউলের সাথে আবদ্ধ হওয়ার বৈশিষ্ট্যের কারণে, এটি অনির্দিষ্ট ক্রস-রিঅ্যাকটিভিটির সম্ভাবনা কমাতে অপরিশোধিত অ্যান্টিবডি বা অ্যান্টিজেন হিসাবে কঠিন-ফেজ বাহকদের জন্য উপযুক্ত। প্লেট একটি নিষ্ক্রিয় প্রোটিন বা সিলিং সমাধান হিসাবে একটি nonionic ডিটারজেন্ট হতে পারে।

(৩) অ্যামিনেশন

একটি পৃষ্ঠ পরিবর্তনের পরে এই মাইক্রোপ্লেটটিতে একটি ইতিবাচক চার্জযুক্ত অ্যামিনো গ্রুপ রয়েছে, যার হাইড্রোফোবিক বন্ড একটি হাইড্রোফিলিক বন্ড দ্বারা প্রতিস্থাপিত হয়। এই শ্রেণীর মাইক্রোপ্লেট ছোট-অণু প্রোটিনের জন্য কঠিন-ফেজ বাহক হিসাবে উপযুক্ত। একটি উপযুক্ত বাফার এবং পিএইচ ব্যবহার করে, পৃষ্ঠটি আয়নিক বন্ধনের মাধ্যমে নেতিবাচকভাবে চার্জযুক্ত ছোট অণুগুলির সাথে আবদ্ধ হয়। এর পৃষ্ঠের হাইড্রোফিলিক বৈশিষ্ট্যের কারণে এবং অন্যান্য ক্রস-লিঙ্কার দ্বারা সমযোজীভাবে আবদ্ধ হওয়ার ক্ষমতার কারণে, এটি ট্রাইটন-100, টুইন 20, ইত্যাদির মতো ডিকনটামিনেশন এজেন্টগুলিতে দ্রবণীয় প্রোটিন অণুগুলিকে ঠিক করতে ব্যবহার করা যেতে পারে। এই প্লেটের ত্রুটি হল হাইড্রোফোবিসিটি হ্রাসের কারণে; অধিকন্তু, পৃষ্ঠটি কার্যকরভাবে বন্ধ করা দরকার। হাইড্রোফিলিক এবং সমযোজী পৃষ্ঠের বৈশিষ্ট্যের কারণে, ব্যবহৃত সিলিং দ্রবণটি অবশ্যই অপ্রতিক্রিয়াশীল অ্যামিনো গ্রুপ এবং নির্বাচিত ক্রসলিংকারের যেকোনো কার্যকরী গ্রুপের সাথে যোগাযোগ করতে সক্ষম হবে।

4. রঙ অনুযায়ী স্বচ্ছ, কালো এবং সাদাতে ভাগ করা যায়।

সবচেয়ে সাধারণ এনজাইম-সংযুক্ত ইমিউনাইজেশন পরীক্ষার জন্য স্বচ্ছ সবচেয়ে বেশি ব্যবহৃত হয়। স্বচ্ছ মাইক্রোপ্লেটের বিপরীতে, আলোকিত সনাক্তকরণের জন্য অস্বচ্ছ মাইক্রোপ্লেট রয়েছে, সাধারণত কালো এবং সাদা। কালো মাইক্রোপ্লেটের নিজেই আলো শোষণ আছে, তাই এর সংকেত সাদা মাইক্রোপ্লেটের তুলনায় অনেক কম, তাই এটি সাধারণত শক্তিশালী আলো সনাক্ত করতে ব্যবহৃত হয়, যেমন ফ্লুরোসেন্স সনাক্তকরণ। সাদা মাইক্রোপ্লেট দুর্বল আলো সনাক্তকরণের জন্য ব্যবহৃত হয়, প্রায়শই সাধারণ কেমিলুমিনেসেন্সের জন্য ব্যবহৃত হয়। উপরন্তু, কালো মাইক্রোপ্লেট অ-নির্দিষ্ট প্রতিক্রিয়ার সমস্যাকেও দুর্বল করতে পারে। একই সময়ে, এটি লক্ষ করা গুরুত্বপূর্ণ যে সাধারণ মাইক্রোপ্লেটের সাথে আলোকিত সনাক্তকরণ করা যায় না, কারণ কেমিলুমিনিসেন্স বিক্রিয়া থেকে নির্গত আলো আইসোট্রপিক হয়, যদি, একটি স্বচ্ছ মাইক্রোপ্লেটের সাথে, আলো কেবল উল্লম্ব দিক থেকে ছড়িয়ে পড়ে না, কিন্তু অনুভূমিক দিক থেকে, গর্ত এবং গর্ত প্রাচীর মধ্যে ফাঁক মাধ্যমে সহজে আলো করতে, গর্ত এর আলো শোষণ মান সংলগ্ন গর্ত নির্গত আলো দ্বারা প্রভাবিত হয় ফলে.

একটি ভাল মাইক্রোপ্লেটের ভাল শোষণ কার্যক্ষমতা, কম ফাঁকা মান, গর্তের নীচের উচ্চ স্বচ্ছতা এবং প্লেটের মধ্যে এবং একই প্লেটের ছিদ্রগুলির মধ্যে অনুরূপ কার্যকারিতা হওয়া উচিত। কাঁচামালের পার্থক্য এবং উত্পাদন প্রক্রিয়ার পার্থক্যের কারণে, বিভিন্ন পণ্যের গুণমান খুব আলাদা, অতএব, ব্যবহারের আগে মাইক্রোপ্লেটের প্রতিটি ব্যাচের কার্যকারিতা অবশ্যই আগে থেকে পরীক্ষা করা উচিত। সাধারণভাবে ব্যবহৃত পরিদর্শন পদ্ধতি হল মানব IgG এর একটি নির্দিষ্ট ঘনত্ব (সাধারণত 10 ng/ml) ELISA প্লেট কূপের সাথে প্রলিপ্ত, ধোয়ার পরে, প্রতিটি কূপে এনজাইম-লেবেলযুক্ত অ্যান্টি-হিউম্যান IgG অ্যান্টিবডির উপযুক্ত তরল যোগ করা, তাপ সংরক্ষণের পরে ধোয়া, সাবস্ট্রেটের রঙ যোগ করে, এনজাইমের বিক্রিয়া বন্ধ করুন এবং যথাক্রমে প্রতিটি কূপে দ্রবণের শোষণ পরিমাপ করুন। প্রতিক্রিয়া শর্তগুলি নিয়ন্ত্রণ করা হয়েছিল যাতে প্রতিটি কূপের পাঠ প্রায় 0.8 এর শোষণে রাখা হয়। মোট রিডিংয়ের গড় গণনা করা হয়েছিল। সমস্ত পৃথক রিডিং এবং সমস্ত রিডিংয়ের গড় মধ্যে পার্থক্য 10% এর কম হবে৷ নিম্নলিখিত তিনটি মাইক্রোপ্লেট হল A, B, এবং C উদাহরণ হিসেবে।

সরাসরি পদ্ধতি: মাইক্রোপ্লেটের পৃষ্ঠে হিউম্যান আইজিজির শোষণ সনাক্ত করতে

ডাবল অ্যান্টিবডি স্যান্ডউইচ পদ্ধতি: অ্যান্টি-হিউম্যান অ্যান্টিবডির জন্য সিরাম ইতিবাচক অ্যান্টিজেন

উপরের চিত্র থেকে দেখা যায়, এই তিন ধরনের জৈব এনজাইম প্লেটে, ক্লাস A মাইক্রোপ্লেটের একটি ভাল প্রোটিন শোষণ প্রভাব রয়েছে, তবে প্রোটিন শোষণের সংবেদনশীলতাও উন্নত করে, যা আরও নির্ভরযোগ্য পরীক্ষামূলক ডেটা সরবরাহ করতে পারে। উপরন্তু, আপনি ব্যাচ পার্থক্য প্লেট সম্পর্কে জিজ্ঞাসা করতে পারেন. নিম্নলিখিত একটি নির্দিষ্ট প্লেট ব্যাচ পার্থক্য. ভিতর-ব্যাচের পার্থক্য ডেটা চার্ট থেকে দেখা যায়, মাইক্রোপ্লেটের আন্তঃ-ব্যাচের স্থিতিশীলতা ভাল, এবং ব্যাচের ভিতরের বৈচিত্র্য সহগ (CV) পার্থক্য প্রায় 5.0%, যা ব্যাচের মধ্যে বৈচিত্র্য সহগের তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে কম। ক্লিনিকাল ইমিউন প্রতিক্রিয়ার জন্য মান নিয়ন্ত্রণের মান 10.0% এর নিচে। অতএব, তাই এটি ELISA পরীক্ষা-নিরীক্ষার জন্যও উপযুক্ত।