ও- নির্দিষ্ট অ্যান্টিজেন পলিস্যাকারাইড, ও-নির্দিষ্ট পলিস্যাকারাইড চেইন নামেও পরিচিত, লিপোপলিস্যাকারাইড অণুর বাইরের স্তরে অবস্থিত এবং কয়েক ডজন (40 পর্যন্ত) অলিগোস্যাকারাইড পুনরাবৃত্তি নিয়ে গঠিত। প্রতিটি অলিগোস্যাকারাইড ইউনিট হল একটি অলিগোস্যাকারাইড যা 3 থেকে 5টি মনোস্যাকারাইডের সমন্বয়ে গঠিত। এই মনোস্যাকারাইডগুলি সাধারণত নিরপেক্ষ শর্করা এবং অ্যামিনো শর্করা। O অ্যান্টিজেন চেইনের গঠন লিপোপলিস্যাকারাইড রচনার সবচেয়ে পরিবর্তনশীল অংশ, এবং এর বৈচিত্র্য বিভিন্ন গ্রাম-নেতিবাচক স্ট্রেনের অ্যান্টিজেন বৈশিষ্ট্য নির্ধারণ করে।

গ্রাম-নেতিবাচক ব্যাকটেরিয়ার O অ্যান্টিজেনের প্রজাতির নির্দিষ্টতা রয়েছে, যা এর পলিস্যাকারাইড চেইনে মনোস্যাকারাইডের বিভিন্ন প্রকার, বন্টন অবস্থান, বিন্যাসের দিকনির্দেশ এবং স্থানিক কনফিগারেশনের কারণে ঘটে। O অ্যান্টিজেন সংশ্লিষ্ট অ্যান্টিবডিগুলির সাথে বিশেষভাবে প্রতিক্রিয়া জানাতে পারে। বিভিন্ন ধরনের Escherichia coli-এর বিভিন্ন ধরনের এবং O অ্যান্টিজেন চেইনের মনোস্যাকারাইডের বিন্যাস রয়েছে, যা নির্দিষ্ট অ্যান্টিজেনিসিটি গঠন করে। অতএব, O অ্যান্টিজেন চেইন হল বিভিন্ন স্ট্রেনের সেরোলজিক্যাল নির্দিষ্টতার কাঠামোগত ভিত্তি। এই গঠনটি গ্রাম-নেতিবাচক স্ট্রেনের প্রধান অ্যান্টিজেনিক নির্ধারক এবং তাদের বেশিরভাগেরই গ্রাম-নেতিবাচক স্ট্রেনের নির্দিষ্টতা রয়েছে, যা স্ট্রেনের নির্দিষ্ট প্রতিক্রিয়া সৃষ্টি করতে পারে। উপনিবেশের রূপবিদ্যা অনুসারে, যখন ও-এন্টিজেন পলিস্যাকারাইড চেইনটি অনুপস্থিত থাকে, তখন এটি রুক্ষ ব্যাকটেরিয়া এবং সম্পূর্ণ ও-অ্যান্টিজেন পলিস্যাকারাইড চেইনটি মসৃণ ব্যাকটেরিয়া।