1. নমুনা যোগ করুন: প্রলিপ্ত প্লেটে নমুনা পাতলা করুন, 1:20 এ পিবিএস বা স্যালাইনে সিরাম পাতলা করুন এবং তারপর মাইক্রোপ্লেটের প্রতিক্রিয়া কূপে 10 উল যোগ করুন।
2. নিয়ন্ত্রণ সংযোজন: 3-ওয়েল নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণ, 1-ওয়েল ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ, এবং 100ul নিয়ন্ত্রণ সিরাম।
3. ইনকিউবেশন: নমুনাটি ভালভাবে মিশ্রিত করার জন্য প্রতিক্রিয়া প্লেটটি ঝাঁকান এবং তারপর এটিকে 37 ডিগ্রি সেলসিয়াস ইনকিউবেটরে বা জলের স্নানে 20 মিনিটের জন্য রাখুন।
4. মেঝে ধোয়া: পাতিত জল দিয়ে 15 মিলি ওয়াশিং সলিউশন 300 মিলিতে পাতলা করুন। হাত দিয়ে ধোয়ার সময়, প্রতিক্রিয়া প্লেটের বাতাসের বিষয়বস্তু ঢেলে দেওয়া উচিত এবং ধোয়ার তরল দিয়ে ভরা গর্তে স্থাপন করা উচিত এবং তারপরে হিংস্রভাবে ঝাঁকাতে 30 দাঁড়ানো উচিত। এই অপারেশনটি 5 বার পুনরাবৃত্তি করুন এবং এটি শুকিয়ে নিন। মেশিনটিকে 5 বার সঞ্চালন করতে হবে। 200ul ওয়াশ দ্রবণ প্রতিটি কূপের মধ্যে ইনজেকশন করা যেতে পারে বা ভরাট করা যেতে পারে, তারপর 30 মিনিটের জন্য রেখে দিয়ে ব্লট করা যেতে পারে।
5. এনজাইম-লেবেলযুক্ত কার্যকরী সমাধান যোগ করুন: 37 ডিগ্রি সেলসিয়াস ইনকিউবেটরে প্রতিটি কূপে 100উল এনজাইম-লেবেলযুক্ত কার্যকরী সমাধান যোগ করুন এবং 20 মিনিট পর প্লেটটি পাঁচবার ধুয়ে ফেলুন। ওয়াশিং প্লেট ধাপ 4 এর মতোই।
6. এটি রঙের বিকাশ এবং প্রতিক্রিয়ার সমাপ্তি সহ প্রতিক্রিয়ার শেষ ধাপ: 50ul সাবস্ট্রেট বিক্রিয়ায় যোগ করা হয় এবং 37 ডিগ্রি সেলসিয়াসে অন্ধকারে 10 মিনিটের জন্য রঙ তৈরি করা হয়। প্রতিটি কূপের সমাধান বন্ধ হয়ে যায় এবং প্রতিক্রিয়া বন্ধ করতে মিশ্রিত। মাইক্রোপ্লেট ব্যবহার জীবাণুমুক্ত অবস্থার অধীনে সঞ্চালিত হবে. ব্যবহারের পরে প্লেটগুলিকে সাবধানে জীবাণুমুক্ত করুন এবং পরিষ্কার করুন, তবে মনে রাখবেন যে কিছু প্লেটকে উচ্চ তাপমাত্রায় জীবাণুমুক্ত করা যায় কিনা তা দেখার জন্য নির্দেশাবলী সাবধানে পড়তে হবে৷